martes, 12 de mayo de 2015

DILUCIONES

Diluir es hacer que disminuya la concentración de una solución, generalmente añadiéndole solvente u otra sustancia.

SOLUCIÓN
Una solución es una mezcla homogénea en la que se encuentran dos o mas sustancias puras


SOLUTO
Es la sustancia disuelta en una solución; por lo regular presente en menor cantidad que el solvente, es la fase dispersa y la que determina las propiedades químicas de la solución.


SOLVENTE
Es la sustancia en la cual se disuelve el soluto; por lo general presente en mayor cantidad que el soluto, es la fase dispersante y la que determina el estado de la solución.


SOLUTO POLAR
               

SOLUTO APOLAR


SOLUCIONES INSATURADAS, SATURADAS Y SOBRESATURADAS

Las soluciones insaturadas son aquellas en la cual la concentración de soluto es menor de la que puede ser disuelto a una temperatura dada.
Las soluciones saturadas son aquellas donde hay tanto soluto como puede ser disuelto a una temperatura dada.

Las soluciones sobresaturadas son aquellas en las cuales la concentracion de soluto es mayor que la de una solución saturada a la misma temperatura, estas soluciones son muy inestables y pueden volverse solución saturada muy facilmente.

UNIDADES DE CONCENTRACIÓN FISICAS
  • PORCENTAJE PESO/PESO (%P/P) 
Es la masa del soluto entre la masa de la solucion multiplicada por cien. 
Resultado de imagen para porcentaje peso a peso
Ejemplo: 1500 gr de solución contiene 15 gr de cloruro de sodio. ¿Calcule el porcentaje P/P de esta solución?

%P/P= 15 gr de NaCL2 . 100 = 1 %P/P
                1500 gr Sln.
  • PORCENTAJE VOLUMEN/VOLUMEN 
Son los militros de soluto entre los mililitros de la solución por cien.

Ejemplo: diga cual es el %V/V cuando se mezclan 250 ml de A con 1000 ml de agua ¿cual es el % V/V de la solución?

%V/V=  250 ml  x 100 = 20 %V/V
             1250ml
  • PORCENTAJE PESO/VOLUMEN
Son los gramos del soluto entre los mililitros de solución por cien.

 

UNIDADES DE CONCENTRACIÓN QUÍMICA
  • [ ] Molar
Numero de moles de soluto en un litro de solución.



Ejemplo: calcule la M de una solucion formada por 4 mol de Al(OH)3 en 400 ml de solución.
M= 4 mol = 10 M
0,4 lt
  • [ ] Molal
Numero de moles de soluto por kg de solvente.
  • [ ] Normal
Numero de equivalentes de soluto por litro de solución



DILUCIONES SERIADAS
Una dilución seriada es simplemente una serie de diluciones simples que amplifican el factor de dilución rápidamente, comenzando con una pequeña cantidad inicial de muestra (cultivo de bacterias, un reactivo químico, un jugo, etc.). La fuente del material para diluir en cada paso viene del material diluido en el tubo anterior. En una dilución seriada el factor de dilución total en cualquier punto es el producto del factor de dilución individual en cada uno de los tubos.


sábado, 9 de mayo de 2015

ELISA





NEFELOMETRÍA Y TURBIDIMETRÍA

Cuando un haz de luz choca con una partícula en suspensión parte de la luz se dispersa, parte de la luz se refleja y parte de la luz se absorbe. La dispersión de la luz depende de: la longitud de onda de la luz (?), del tamaño de la partícula y del índice de refracción de la partícula en relación con el medio que la rodea. La dispersión de la luz se puede medir por turbidimetría o por nefelometría. En ambas técnicas, para dar como resultado una concentración de proteína concreta, se compara la cantidad de luz dispersada o la tasa de aumento de dispersión con los valores de dichos parámetros en estándares proteicos conocidos.
LA TURBIDIMETRÍA:
mide la disminución de la luz transmitida a través de una suspensión de partículas utilizando para ello un espectrofotómetro (detector en la misma dirección del haz de luz, se mide A o T). Se suele utilizar para soluciones concentradas (para que haya una buena disminución de la luz transmitida) ej. determinación de proteínas totales en suero, LCR u orina (haciendo que las proteínas precipiten con TCA o ácido sulfosalicílico). 




La turbidez es la propiedad óptica de una muestra que hace que la radiación sea dispersada y absorbida más que transmitida en línea recta a través de la muestra. Es ocasionada por la presencia de materia suspendida en un líquido. Y para medirla utilizamos ambos métodos. 


FUNDAMENTO DE LA TECNICA 

La turbidimetría puede realizarse en espectrofotómetros de visible o violeta. Cuando la concentración de partículas en suspensión se mide por turbidimetría, la suspensión se pone en una cubeta similar a un tubo de ensayo, que permite realizar las medidas de las energía incidentes y transmitidas. La fuente de radiación más frecuentemente usadas es la lámpara dewolframio, pero pueden utilizarse otras fuentes de radiación visible. Si ponemos en la cubeta suspensiones coloreadas se debe usar un filtro para evitar que influya sobre los resultados dando valores excesivamente altos. Los Turbidímetros pueden incorporar cualquier detector que sea sensible a la longitud de onda transmitida.


Turbidímetros

Casi todas las medidas turbidimetricas se realizan con colorímetros 
o espectrofotómetros ordinarios. También pueden usarse instrumentos visuales sencillos, tales como el trubidímetro Parr o el colorímetro Duboscq.




APLICACIONES

  • Monitoreo del crecimiento del cultivo bacteriano.
  • Contenido de macromoleculas.
  • La de terminacion de aminoácidos, vitaminas y antibióticos.
  • Control de calidad de agua, bebidas y productos alimenticios.
  • Reacciones de precipitación.


LA NEFELOMETRIA:

mide la luz dispersada en dirección distinta a la luz emitida (generalmente con ángulos que oscilan entre 15 y 90º). Utiliza como instrumento el nefelómetro (en el que el detector se ubica con un ángulo que oscila entre 15 y 90º ej. a 90º). Se suele utilizar para concentraciones más diluidas.
Se basa en la detección de los complejos Ag-Ab, por la refracción que dichos complejos producen sobre rayos de luz que se hacen pasar por el tubo con el antígeno y el anticuerpo correspondiente. Habitualmente se utilizan rayos láser y se establece una relación entre lacantidad de luz que llega y la cantidad de complejos formados.



La nefelometría es un procedimiento analítico que se basa en la dispercion de la radiación que atraviesan las partículas de materia. Cuando la luz atraviesa un medio transparente en el que existe una suspensión de partículas sólidas, se dispersa en todas direcciones y como consecuencia se observa turbia. La dispersión no supone la pérdida neta de potencia radiante,solo es afectada la dirección de la propagación, porque la intensidad de la radiación es la misma en cualquier ángulo. La intensidad depende de:
  1. el número de partículas suspendidas,su tamaño, su forma. 
  2. los índices refractivos de la partícula y del medio dispersante. 
  3. la longitud de onda de la radiación dispersada. 
  4. La relación entre variables y es más factible un tratamiento teórico, pero debido a su complejidad raras veces se aplica a problemas analíticos específicos. 
El procedimiento generalmente es empírico y sólo se consideran 3 factores:
  1. La concentración: Mayor sea el número de partículas, mayor es la dispersión. 
  2. Tamaño de la partícula: Factores como el pH, la velocidad y orden de la mezcla, concentración de los reactivos, duración del estado de reposo y la fuerza iónica. 
  3. Longitud de onda: Generalmente las muestras se iluminan con luz blanca, pero si están coloreadas, se debe escoger una porción del espectro electromagnético en la que la absorción del medio se reduzca al mínimo. 

NEFELOMETRO


Un nefelómetro es un instrumento para medir partículas suspendidas en un líquido. Esto lo hace empleando una fotocelda colocada en un ángulo de 90° con respecto a una fuente luminosa. La densidad de partículas es entonces una función de la luz reflejada por las partículas a la foto celda. Cuanta más luz se refleje en una determinada densidad de partículas depende delas propiedades de las partículas como su forma, color y reflectividad. Estableciendo a una correlación de trabajo entre turbidez y solidos suspendidos (que más útil, pero generalmente una más difícil de cuantificación de partículas) debe ser establecido independientemente para cada situación.


BIBLIOGRAFIA
http://es.scribd.com/doc/54885577/Turbidimetria-y-Nefelometria#scribd 
http://www4.ujaen.es/~esiles/TEMA3PROTEINASalumno.pdf